生物样本大都对温度极其敏感,尤其是细胞样本、制品。随着细胞治疗的快速发展,细胞冷冻技术及效果变得更加重要。现在也有一些冷冻降温是通过高溶度的冻存保护剂保障活率,大剂量的冻存保护剂往往对细胞、回输受体有害,如何安全有效的提高细胞及制剂的冷冻效果,是一个重要课题。
程序降温仪是一种高性能,安全可靠的温变速率可调的冷冻系统,现已广泛应用于轻工、农、医、基础生物研究等各个领域中,用于组织库、骨髓细胞、肿瘤细胞,动、植物细胞、心肌细胞等的冻存。
程序降温仪能够提供可靠和精确的样品温度调节。控制器使用一个侍服系统,通过持续可变的热流调节使得样品得温度达到预设的或通过电脑程序设定的温度。温度程序精确执行,温度可以设定达到控制范围内的任一点。使用程序降温仪对生物样本进行降温,不仅可以弥补传统样本降温的不足之处,而且可以做到降温全流程可监控追溯。
使用步骤:
1、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。
2、配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、血清,逐滴加入二甲基亚砜(DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。
3、离心收集培养之细胞,用加血清的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1ml)计数细胞浓度及冻前存活率。
4、取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ml,混合均匀,分装于已标示*之冷冻保存管中,1~2ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
应用领域:
1、转基因胚胎研究;
2、干细胞研究;
3、临床和研究样本,例如常规冷冻管中的淋巴细胞和组织细胞;
4、各种哺乳动物细胞,包括心肌细胞,脂肪,肝和肌肉;
5、脐带血干细胞;
6、微孔板中的贴壁细胞和干细胞;
7、细胞悬浮液按编号/条形码分类和储存;
8、机器人集成-CRF-1也已成功集成到机器人系统中;
9、人的和兽医的IVF(试管受精)。
